支原體PCR檢測實(shí)驗操作樣品的收集
更新時(shí)間:2017-11-17 | 點(diǎn)擊率:1396
支原體PCR檢測實(shí)驗操作樣品的收集
支原體PCR檢測實(shí)驗操作
PCR反應的前期操作應在無(wú)菌環(huán)境中進(jìn)行。
?。?)樣品的收集:待測細胞用抗培養基培養7d,用無(wú)菌容器取上清液500ul,4℃保存待測。
?。?)模板的制作:在無(wú)菌的條件下,取細胞培養上清100ul于一無(wú)菌的0.5ml塑料離心管內,蓋好蓋子,95℃水浴加熱5min。
?。?)打開(kāi)蓋子,向管內加StrataCleanresin10ul,蓋好蓋子,旋渦混懸器混合,離心5—10s,吸取上清至一新的塑料離心管中,模板制作完畢,4℃保存。
?。?)PCR反應:反應體系zui適條件為:10mmol/lTris-HCL(pH8.38);50mmol/lHCL;1.5-2.5mmol/lMgCL2;200umol/ldNTP;2UDapDNA聚合酶??偡磻w系為50ul,反應用去離子水均需用12000uw/cm2紫外燈照射。
VenorGeM支原體污染檢測試劑盒(一步法)支原體PCR檢測試劑盒組成:
Mix干粉(引物、dNTP、熱啟動(dòng)taq酶,內控對照),重懸緩沖液,陽(yáng)性對照DNA,Tris/EDTA緩沖液。
特點(diǎn):
廣譜(包含常規26種支原體)
靈敏度高
特異性好
操作簡(jiǎn)單
便捷(整個(gè)操作不到3小時(shí))