彎曲菌是一種常見(jiàn)的導致人類(lèi)腸炎的致病菌,以腹瀉為主要特征,并可從糞便中分離出來(lái)。它污染食物和水,夏季是傳染高峰。
彎曲菌為革蘭陰性,螺旋形彎曲,有動(dòng)力;培養時(shí)需3~15%氧,為微需氧菌;氧化酶陽(yáng)性,還可還原性硝酸鹽。ISO于2017年發(fā)布了新版的ISO10272-1:2017標準,即《食品鏈的微生物學(xué),彎曲菌屬檢測和計數的水平方法》,它取代的是舊版ISO 10272-1:2006。具體改變主要是:
1. 包括了二次增菌肉湯(Preston肉湯),主要為了克服背景菌對第三代-內酰胺類(lèi)抗生素如頭孢哌酮的耐藥;
2. 增加了直接在mCCDA上的接種步驟;
3. 驗證試驗刪掉了微需氧生長(cháng),只規定了25℃需氧生長(cháng);
該ISO適用于食品、飼料和環(huán)境樣品。
ISO10272-1:2017建議的彎曲菌檢測方案,依據樣本類(lèi)型和檢測目的,分為三種:1)在彎曲菌多的時(shí)候,不需要增菌,用方案C;2)對于彎曲菌和背景菌都較少的情況,用方案A,例如烹制過(guò)的或低溫食品。取樣后再Bolton肉湯微需氧37℃先培養4-6h,再41.5℃培養44h±4h;3)對于彎曲菌少,背景菌多的情況,例如生肉、生乳,采用方案B,在Preston肉湯中微需氧41.5℃培養24h±2h。
增菌后,方案A是采用mCCD瓊脂和另一款其選擇劑不同于mCCD的彎曲菌選擇分離培養基來(lái)分離,方案B是采用mCCD瓊脂來(lái)分離。均為微需氧41.5℃培養44h±4h。在mCCD瓊脂上彎曲菌典型菌落為灰色。對于ISO10272-1:2017中方案A所提到的另一款其選擇劑不同于mCCD的彎曲菌選擇分離培養基,可選擇HiMedia公司生產(chǎn)的HiCrome彎曲菌顯色培養基(貨號M2020,配合彎曲菌選擇性添加劑(貨號FD178)一起使用)。該顯色培養基含有復合蛋白胨、氯化鈉、多種顯色劑、生長(cháng)因子和瓊脂。適用于食品樣本和臨床樣本。培養基配好為在平皿中為黃色透明至輕微不透明凝膠。35-37℃孵育24-48小時(shí)后,彎曲菌菌落為淡紫色(下圖),而金葡菌和大腸埃希菌均被抑制。
HiMedia公司是微生物產(chǎn)品生產(chǎn)商,一直致力于微生物培養基和細胞培養基的研發(fā)和生產(chǎn),具有WHO GMP認證、ISO9001:2008,ISO13485:2003認證,CE認證和FDA注冊登記。其產(chǎn)品行銷(xiāo)140多個(gè)國家。
締一生物作為HiMedia公司在中國的代理商,在微生物培養和檢測領(lǐng)域,一如既往地為您帶來(lái)的服務(wù)。