萬(wàn)古霉素是一種抗生素,通過(guò)干擾細菌細胞壁結構中的肽聚糖來(lái)干擾細胞壁的合成,抑制細胞壁中磷脂和多肽的生成,以抑制細菌生長(cháng)繁殖。
耐萬(wàn)古霉素腸球菌(Vancomycin-Resistant Enterococcus,簡(jiǎn)稱(chēng)VRE),是腸球菌屬下的一種細菌,有著(zhù)對萬(wàn)古霉素這種抗生素的抗藥性。主要分布在哺乳動(dòng)物腸內、消化道和尿道中(1)。VRE感染多發(fā)生于免疫力低下者,癌癥、肝硬化、幔性腎炎尿毒癥、腦梗死等重癥住院患者,主要造成肺部、腹腔、血液、手術(shù)傷口、泌尿道感染,致死率很高(2)。
腸球菌感染作為一種引起醫院感染的主要致病菌,已經(jīng)引起醫學(xué)界的廣泛關(guān)注。例如我國在1986年就開(kāi)始對全國醫院中的對耐藥葡萄球菌和耐萬(wàn)古霉素腸球菌進(jìn)行監測;2015年修訂《臨床抗菌藥物合理應用指導原則》等。為降低VRE感染風(fēng)險,提高VRE菌檢率,加強對耐藥菌的監測,尤其對易感人群耐藥菌的監測非常重要。
HiMedia公司的HiCrome系列培養基產(chǎn)品,操作便捷,更加環(huán)保,特異性和靈敏度高,準確率達99%,價(jià)格更低且貨期穩定。
HiCrome耐萬(wàn)古霉素腸球菌顯色培養基(貨號:M1830,品名:HiCrome VRE Agar Base)
用于從臨床樣本中鑒定耐萬(wàn)古霉素腸球菌。例如,M1830曾被用于研究護士白大衣中的VRE細菌污染(3)。
VRE通常在醫院和慢病護理機構中傳播,例如對患者的糞便鏡下計數會(huì )導致醫院環(huán)境的污染和傳染。傳統已有許多培養基用于檢測VRE,如耐萬(wàn)古霉素腸球菌基礎肉湯或瓊脂,或者是添加萬(wàn)古霉素的膽汁七葉苷瓊脂。
M1830培養基中的特別蛋白胨提供氮源和碳源化合物、長(cháng)鏈氨基酸、維生素和其他生長(cháng)所需的必要營(yíng)養;氯化鈉維持滲透壓平衡;緩沖鹽提供緩沖系統;添加劑可選擇性分離耐萬(wàn)古霉素的腸球菌。
加入添加劑(FD277),35-37℃培養24-48小時(shí)后,耐萬(wàn)古霉素糞腸球菌接種量為50-100CFU,在培養基上旺盛生長(cháng),裂解培養基中的顯色底物,產(chǎn)生藍綠色菌落,在不透明的凝膠背景下十分清晰(圖1),且回收率≥50%. 糞腸球菌和金黃色葡萄球菌接種量均>103CFU,生長(cháng)受到抑制,回收率為0%.
圖1:M1830,耐萬(wàn)古霉素糞腸球菌落呈藍綠色。
HiCrome第二代耐萬(wàn)古霉素腸球菌顯色培養基(貨號:M1925 ,品名:HiCrome VRE Agar Base, Modified)推薦用于從臨床樣本中選擇性分離和鑒別耐萬(wàn)古霉素的糞腸球菌和屎腸球菌。
M1925中的特別蛋白胨提供微生物生長(cháng)必要的養分和維生素;氯化鈉維持滲透壓平衡;酚紅為pH指示劑,阿拉伯糖為發(fā)酵糖。添加劑(FD277)用于選擇性分離耐萬(wàn)古霉素的腸球菌。
35-37℃培養24-48小時(shí)后,由于腸球菌屬含葡萄糖苷酶,可裂解培養基中的顯色底物,產(chǎn)生藍色菌落;屎腸球菌發(fā)酵阿拉伯糖,裂解顯色底物,產(chǎn)生綠色菌落和黃色背景。(圖2)
其中,耐萬(wàn)古霉素糞腸球菌(VRE)與耐萬(wàn)古霉素屎腸球菌(VRE)接種量分別為50-100CFU,生長(cháng)旺盛且回收率≥50%.糞腸球菌和金黃色葡萄球菌接種量均>103CFU,生長(cháng)受到抑制,回收率為0%.
圖2:M1925,左側:耐萬(wàn)古霉素屎腸球菌為綠色菌落,右側:耐萬(wàn)古霉素糞腸球菌成藍綠色菌落
以上兩款培養基可直接用來(lái)自篩查拭子的菌液接種。應將分離的菌落制備為液體菌液,其濁度大約為0.5 McFarland單位。
參考文獻:
1. Mara D.,Horan NJ: The Handbook of water, wasterwater and microbiology. Amsterdam, The Netherlands, Academic Press;2003
2. Mascini EM, Bonten MJ: Vancomycin-resistant enterococci: consequences for therapy and infection control. Clin Microbiol Infect. 2005, 11(Suppl.4):43-56
3.Priyanka Gupta MSc, Nilanjana Bairagi PhD , Richa Priyadarshini PhD.Bacterial contamination of nurses' white coats after first and second shift. American Journal of Infection Control[J]. 2017,45(1): 86-88.
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