在微生物檢測領(lǐng)域,PCR和qPCR已得到廣泛的應用,甚至現在已經(jīng)發(fā)展到了多重PCR檢測。無(wú)論是食品、乳品、制藥工業(yè)、出入境檢驗檢疫還是臨床和科研領(lǐng)域,核酸擴增檢測都是一種方便、快捷、靈敏的方法。
為保證標準化操作,并和接軌,我國食品、出入境、臨床等行業(yè)也出臺了PCR和qPCR的相關(guān)標準。如GB/T 27403.2008《實(shí)驗室質(zhì)量控制規范 食品分子生物學(xué)檢測》提出,在對方法確認時(shí),應使用“參考標準或標準物質(zhì)進(jìn)行校準”。檢測物種的DNA標準對PCR就非常重要,不僅可作為陽(yáng)性對照,而且可檢測該方法或該試劑盒的靈敏度、特異性、確保PCR方法(PCR儀、試劑盒、操作)的可靠,以及能達到性能上的要求。
德國著(zhù)名微生物檢測產(chǎn)品生產(chǎn)商Minerva Biolabs公司提供有一系列的微生物DNA標準品,方便檢測方法的校準,也可作為PCR的陽(yáng)性對照,免去用戶(hù)自己提取DNA和菌種鑒定的麻煩。
其產(chǎn)品包括如下兩大類(lèi):
一、基因組DNA標準品
(英文:Genomic DNA Extracts - Specifity Standards)
它用于PCR方法的特異性檢查。該基因組DNA系抽提而成,來(lái)自低傳代數、物種明確的菌種。DNA經(jīng)部分測序驗證,滴度經(jīng)光密度測定(小牛胸腺DNA標準品為對照)。
具體產(chǎn)品見(jiàn)下表:
以上每盒產(chǎn)品含1管菌種基因組DNA(10ng±2 ng,凍干粉)、1管Tris緩沖液(200μl,10mM, pH 8.5)用于溶解DNA。
二、PCR定量標準品
英文:(PCR Quantification Standards)
它也是基因組標準品,但經(jīng)過(guò)了嚴格的定量,每盒產(chǎn)品含1×10∧8基因組(凍干粉),3管2ml Tris緩沖液(10mM,pH8.5,用于溶解DNA),可制備濃度梯度的DNA標準品,從而可繪制qPCR標準曲線(xiàn),以評估qPCR檢測方法的性能。
Minerva Biolabs公司簡(jiǎn)介
● 世界著(zhù)名微生物PCR專(zhuān)業(yè)診斷工具生產(chǎn)商,總部位于德國柏林,創(chuàng )始人來(lái)自的羅伯特·科赫研究所;
● 自1999年起即研發(fā)細胞培養和生物藥工業(yè)用QC檢測試劑;
● 配備生物安全二級實(shí)驗室;
● GMP級潔凈車(chē)間生產(chǎn);
● 支原體PCR檢測試劑供應商;
● IOM和PDA成員;
● ISO 9001和ISO 13485認證;
2005年,上海締一生物生物科技有限公司作為全國總代理,將Minerva的優(yōu)秀產(chǎn)品引入中國。數年來(lái),不斷為中國生物研究實(shí)驗室,以及眾多工業(yè)企業(yè),提供了完整高效的病原菌、支原體等微生物檢測及祛除解決方案。