貨號 | 名稱(chēng) | 規格 | 存儲 |
MV1575A | HiCrome™ EC O157:H7 Selective Agar Base,Modified(需添加劑FD187) | 100G,500G | 2-8℃密閉 |
FD187 | HiCrome EC O157:H7 Selective Supplement | 5VL | 2-8℃ |
原理
腸出血性大腸桿菌又名為產(chǎn)Vero細胞毒素的大腸桿菌(VTEC/EHEC)。盡管有許多血清型大腸桿菌產(chǎn)Vero細胞毒素(3),但大腸桿菌O157:H7是導致人類(lèi)感染的常見(jiàn)的一種。它有幾種不常見(jiàn)的生化特性可用于鑒定。它屬于僅少數的beta葡萄糖醛酸酶(-),24小時(shí)內不發(fā)酵山梨醇或鼠李糖。它們可從接種到含山梨醇而非乳糖的培養基的糞便標本中分離出來(lái)。
該款顯色培養基采用植物源蛋白胨,以取代動(dòng)物源,避免了BSE/TSE風(fēng)險。它基于 Rappaport 和Henigh(1)描述的配方而成。培養基含山梨醇和顯色混合劑,不含乳糖和指示劑染料。顯色劑被大腸桿菌O157:H7 特異性裂解,產(chǎn)生深紫至洋紅色。普通大腸桿菌形成藍綠色菌落。
培養基中的HiVeg的水解物和酵母粉提供碳源、氮源營(yíng)養和長(cháng)鏈氨基酸、維生素和其他生長(cháng)營(yíng)養。氯化鈉維持滲透壓平衡。添加劑使培養基更具有選擇性(2)。添加劑中的亞碲酸鉀選擇性抑制氣單胞菌和普羅威登菌。添加劑中的新生霉素抑制革蘭陽(yáng)性菌。月桂基硫酸鈉抑制伴隨的革蘭陽(yáng)性菌群。
培養基成分
組成 G/L
HiVeg的水解物 5.000
酵母粉 3.000
山梨醇 7.000
合成離子活性劑1號 1.500
月桂基硫酸鈉 0.100
顯色混合劑 0.250
瓊脂 15.000
終pH(25°C) 6.8±0.2
配制
31.85g溶于990ml蒸餾水,加熱至沸使*溶解。高壓滅菌后,冷卻至45-50℃,無(wú)菌加入復溶的添加劑(貨號FD187,先用10ml蒸餾水復溶)?;靹虿A注平板。
質(zhì)量控制
外觀(guān):奶油色至黃色均一自由粉末
成膠性: 牢固,與1.5%瓊脂相當
制備好的培養基顏色和透明度:在平皿中為淺琥珀色,透明至輕微不透明凝膠
配比反應:25°C下3.18% w/v水溶液,pH值為6.8±0.2
pH值要求:6.60-7.00
培養反應:
加入添加劑(貨號FD187)后,在35-37°C培養18-24小時(shí),觀(guān)察如下:
菌種 | 接種量(CFU) | 生長(cháng)狀況 | 回收率 | 菌落顏色 |
大腸桿菌ATCC 25922 | 50-100 | 生長(cháng)很少 | ≤10% | 藍綠色 |
大腸桿菌O157:H7 NCTC 12900 | 50-100 | 旺盛 | ≥50% | 深紫-洋紅色 |
肺炎克雷伯菌 ATCC 13883 | 50-100 | 一般-好 | 30-40% | 無(wú)色-淡紫色(黏液狀) |
銅綠假單胞菌 ATCC 27853 | 50-100 | 一般-好 | 30-40% | 無(wú)色 |
金黃色葡萄球菌 ATCC 25923 | ≥103 | 抑制 | 0% |
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枯草芽孢桿菌 ATCC 6633 | ≥103 | 抑制 | 0% |
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參考文獻
1.Rappaport F.and Henigh E.,1952,J.Clin.Pathol.,5:361.
2.Zadik P.M.,Cahpman P.A.and Siddons C. A.,1993,J.Med.Microbiol.,39,155-158.
3.Smith and Scottland,1988,J.Med.Microbiol.,26:77-85