大腸桿菌O157計數培養基(膜過(guò)濾法)
貨號 | 名稱(chēng) | 價(jià)格 | 存儲 |
M1862 | Hicrome™ M- Modified EC0157:H7 Selective Agar Base | 100G,500G | 2-8°C密封 |
FD295 | HiCrome ECO157: H7 Selective Supplement, Modified | 2VL,2X5VL | 2-8°C |
用途
推薦用于薄膜過(guò)濾法初步計數食品中大腸桿菌O157:H7
原理
該培養基推薦用于從肉、禽、奶、嬰兒配方乳等食品中分離大腸桿菌O157:H7(1,2)。它基于三種生化反應(酶)進(jìn)行鑒別——葡萄糖醛酸酶、山梨醇發(fā)酵和賴(lài)氨酸脫羧酶(4),大腸桿菌O157為(-)(-)(+)。
培養基中的細菌會(huì )先發(fā)酵葡萄糖。葡萄糖耗竭后發(fā)酵山梨醇,導致pH值下降(酚紅為指示劑),使菌落呈黃色。培養基還含有β葡萄糖醛酸酶的顯色底物,使菌落為藍色。對于山梨醇發(fā)酵(+)菌或賴(lài)氨酸(-)菌,其菌落中的藍色和黃色疊加為綠色。培養基中有賴(lài)氨酸,使賴(lài)氨酸脫羧酶陽(yáng)性菌代謝后使pH值升高,產(chǎn)生粉色菌落。抑制劑中的莫能菌素抑制革蘭陽(yáng)性菌,在44-44.5℃孵育可抑制革蘭陰性菌,
該培養基也用于食品中的大腸桿菌計數(3)。
培養基成分
組成 克/升
動(dòng)物組織酶解物 5.000
酵母粉 3.000
氯化鈉 5.000
賴(lài)氨酸 10.000
山梨醇 20.000
葡萄糖 2.500
硫酸鎂 1.500
脫氧膽酸鈉 0.150
葡萄糖醛酸鈉 0.500
酚紅 0.120
顯色混合劑 0.050
瓊脂 15.000
終 pH (25°C) 7.2±0.2
配制
62.82g重懸于1000ml蒸餾水,加熱至沸騰使*溶解。請勿高壓滅菌。冷卻至45-50°C,無(wú)菌加入1管添加劑(FD295),混勻并傾注平板。
培養結果
加入添加劑(貨號FD295)后,44 -44.5°C培養18-24小時(shí),結果如下:
大腸桿菌——綠色
大腸桿菌O157:H7——粉色
肺炎克雷伯菌——黃色
脫氧膽酸鈉和添加劑增加選擇性——革蘭氏陽(yáng)性菌被抑制
參考文獻
1.Entis, P.,and I. Lerner.1997. 24-hour presumptive enumeration of Escherichia coli o157:H7 in food using the ISO-GRID method with SD-39 agar.J.Food Prot. 60:883-890.
2.Entis, P.1998. Direct 24-hour presumptive enumeration of Escherichia coli o157:H7 in food using the hydrophobic grid membrane filter,followed by serological confirmation : collaborative study.J.AOAC Int. 81:403-418.
3.Entis, P., and I.Lerner. 1998. Enumeration of #-glucuronidase positive E.coli in foods by using the ISO-GRID method with SD-39 agar.J.Food Prot. 61:913-916.
4.Corry J.E.L, Curtis G.D.W., Baird R.M., Culture Media for Food Microbiology, Progress in Industrial Microbiology, Volume 37.