支原體常規PCR檢測試劑盒(經(jīng)典法)(含Taq酶)
Venor® Gem Classic
貨號 | 品名 | 規格 | 價(jià)格 |
11-1025G | 支原體常規PCR檢測試劑盒(經(jīng)典法)(含Taq酶) Venor® Gem Classic | 25次/盒 | 詢(xún)價(jià) |
11-1050G | 50次/盒 | 詢(xún)價(jià) | |
11-1100G | 100次/盒 | 詢(xún)價(jià) | |
11-1250G | 250次/盒 | 詢(xún)價(jià) |
特點(diǎn)
1.內控對照為獨立包裝,遵循歐洲藥典和日本藥典操作流程。
2.高特異性,僅一條陽(yáng)性對照條帶,即可涵蓋所有可能感染細胞的支原體物種。操作簡(jiǎn)單,
易于觀(guān)察。
3. 高靈敏度,若PCR反應體系加入10μl樣本,支原體檢測限度為≤5或≤10CFU。
(詳見(jiàn)下文“(2)Venor® Gem Classic Kit 10種常見(jiàn)支原體檢測限“)
4.歐洲藥典要求的26種支原體均可檢出。該試劑盒可檢測出1種脲原體、7種無(wú)膽甾原體和85種支原體,與細菌和真核DNA無(wú)交叉反應。
5.試劑盒內包含Taq酶,無(wú)需另外購買(mǎi)。
Venor® Gem Classic Kit
10種常見(jiàn)支原體檢測限
物種 | 檢測限 | 物種 | 檢測限 |
萊氏無(wú)膽甾原體 | ≤5 | 肺炎支原體 | ≤10 |
豬鼻支原體 | ≤10 | 精氨酸支原體 | ≤10 |
發(fā)酵支原體 | ≤10 | 雞敗血支原體 | ≤10 |
口腔支原體 | ≤10 | 螺原體 | ≤10 |
關(guān)節液支原體 | ≤10 | 唾液支原體 | ≤10 |
操作步驟
第1步:樣本處理
a. 細胞培養上清
b. 生物藥或需遵循藥典的樣本
說(shuō)明:①樣品基質(zhì)可能會(huì )影響檢測的靈敏度。收集和篩選更高的樣品量可提高測定靈敏度。
②細胞培養物樣本含豐富的DNA酶,在低溫下也能降解支原DNA,影響檢測靈敏度。
建議:樣本做DNA抽提處理,實(shí)現高靈敏度。
推薦:德國MB公司生產(chǎn)的支原體DNA提取試劑盒Venor® Gem Sample Preparation Kit該DNA抽提試劑盒已經(jīng)過(guò)廣泛驗證。
第2步:試劑制備
第3步:PCR體系建立
a. 細胞培養上清
b. 生物藥或需遵循藥典的樣本
第4步:?jiǎn)?dòng)PCR反應
第5步:電泳結果分析
191bp為內控對照條帶,表明PCR反應正常。
當樣本存在支原體污染時(shí),由于內控對照與支原體DNA存在競爭,內控對照條帶變弱(例如支原體DNA>103拷貝)。
陽(yáng)性對照中支原體DNA>104拷貝,內控對照條帶會(huì )*消失。
可能在80-90bp存在引物自退火形成的條帶,此條帶不影響檢測結果。
如果待測樣本對PCR產(chǎn)生抑制,則內控對照條帶變弱(和陰性對照相比),此時(shí)應先進(jìn)行DNA抽提(推薦使用:Venor® Gem Sample Preparation Kit 支原體DNA抽提試劑盒,詳見(jiàn)第25頁(yè)),然后再檢測。
儲存條件
2~8℃至少6個(gè)月。復溶后在-18℃保存。