背根神經節(jié)是位于脊椎間孔內、靠近脊髓的神經結節(jié)。它負責向脊髓傳遞各種感覺信號,如溫度覺、觸覺、痛覺等。
背根神經節(jié)細胞的體外培養(yǎng)可用于研究神經軸突再生,從而有助于脊髓損傷的治療。
在研究神經軸突再生機制時,電穿孔轉染siRNA 或質粒是一種重要的研究方法。
對于神經元細胞,電傳孔轉染效率顯著高于其他方法,但對細胞可能有一定損傷。
2020年9月,《中國組織工程研究》期刊在線發(fā)表了《無血清培養(yǎng)基和有血清培養(yǎng)基對背根神經節(jié)生長的差異》的研究,揭示出在電轉條件下,血清對背根神經節(jié)的體外培養(yǎng)有重要作用,因此無血清培養(yǎng)基無法取代有血清培養(yǎng)基。
該研究即將刊登在2021年第13期的紙質版期刊上。
研究人員取出小鼠的背根神經節(jié)組織,用膠原酶消化后,分別用含5%胎牛血清的MEM培養(yǎng)基和無血清的MEM培養(yǎng)背根神經節(jié)細胞。
同時,用電傳孔方法轉染增強型綠色熒光蛋白(EGFP) 質粒至細胞內。
培養(yǎng)3天后,觀察在光鏡下觀察細胞形態(tài)及生長狀況,并進行神經元標志物染色,在熒光顯微鏡下觀察,并測量軸突長度。
結果顯示:
1、在電轉和非電轉條件下,無血清并不影響背根神經節(jié)細胞的軸突再生的長度和軸突的分支。
2、在電轉的條件下,背根神經節(jié)神經元的存活數(shù)均減少,且電轉無血清組的細胞存活數(shù)比電轉有血清組明顯減少。
3、無論是否有血清,電傳孔傳染效率均為20%左右。
該研究揭示出,電轉對神經細胞存在一定的損傷,但血清對細胞有明顯的保護作用。該結論也可能適用于其他細胞類型。
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