日本筑波-染色體形式的DNA是生命的基本組成部分,這已不是什么秘密。細胞分裂過(guò)程中染色體的不正確分布會(huì )帶來(lái)災難性的后果。不平衡的染色體拷貝或非整倍性是腫瘤的標志,并影響包括人類(lèi)在內的所有生物的發(fā)育和存活。
細胞如何傳播遺傳物質(zhì)已經(jīng)使研究人員著(zhù)迷了幾個(gè)世紀。在2020年6月發(fā)表于《核酸研究》上的一項研究中,筑波大學(xué)的研究人員在木村敬二副教授的帶領(lǐng)下,確定了一種新的蛋白質(zhì)復合體NWC,它參與了染色體的分布。
NWC與核仁(一種無(wú)膜的核內結構)相關(guān),并在細胞分裂過(guò)程中重新定位到染色體的外圍。這種蛋白質(zhì)復合物包含三種不同的蛋白質(zhì):1,WDR43和Cirhin。1通常與核仁相關(guān),而WDR43和Cirhin是WD重復蛋白。木村副教授說(shuō):“這項研究很重要,因為迄今為止,核仁蛋白的有絲分裂功能尚未得到充分表征。”
該團隊使用免疫熒光技術(shù)檢測了1在人細胞中的定位。使用專(zhuān)門(mén)的顯微鏡,蛋白質(zhì)的位置可以通過(guò)其“發(fā)光”顯示出來(lái)。他們發(fā)現,1在有絲分裂或核分裂過(guò)程中位于染色體的外圍。木村副教授解釋說(shuō):“當我們檢查1蛋白時(shí),我們意識到它沒(méi)有任何功能性基序。然后,我們探索了它可能與其他蛋白復合的功能。”
使用先進(jìn)的分子技術(shù),研究團隊確定了NWC復合物并對其進(jìn)行了表征。他們檢查了從復合物中去除單個(gè)蛋白質(zhì)的效果,發(fā)現NWC定位于染色體并在有絲分裂中起作用需要所有三個(gè)組件。減少細胞中NWC的量會(huì )導致細胞周期進(jìn)程不*,從而導致染色體無(wú)法分離,錯位,以及準確的染色體分布所需的蛋白質(zhì)的位置和濃度存在缺陷,包括Aurora B,粘著(zhù)蛋白復合物和組蛋白H3磷酸化。
Kimura副教授及其同事提出的結果表明,NWC通過(guò)允許Aurora B在著(zhù)絲粒處積累(部分通過(guò)調節組蛋白磷酸化)而在有絲分裂染色體穩定性中發(fā)揮特定作用。NWC如何控制著(zhù)絲粒附近的組蛋白磷酸化仍有待確定。
鑒于正確的染色體傳播對于生命和疾病的預防至關(guān)重要,因此這些結果可能會(huì )成為尋找基因的新焦點(diǎn),這些基因突變后會(huì )導致非整倍性或染色體拷貝失衡。
血清的熱滅活是很多培養者感興趣的話(huà)題,價(jià)格不菲的血清中含有諸如生長(cháng)因子,維生素,氨基酸等珍貴物質(zhì),而將它們置于50℃以上的溫度長(cháng)達30分鐘是*沒(méi)有必要的。盡管如此,在大多數實(shí)驗室之中血清的熱滅活還是作為常規來(lái)執行,多數實(shí)驗者并沒(méi)有考慮熱處理對血清中的生長(cháng)因子、氨基酸等成分帶來(lái)的負面影響,在我們的技術(shù)熱線(xiàn)中常常被提到的就是“是否該對血清進(jìn)行熱滅活”,下面我們就對胎牛血清的熱滅活進(jìn)行一些探討和解釋。
編輯
①選用與血清瓶同規格的對照瓶一個(gè)。
②對照瓶?jì)确湃肱c血清等體積的水。
③溫度預試。
對照瓶?jì)炔迦?—3支經(jīng)挑選的溫度計(保證測試溫度的準確性),放入水浴箱中,接通電源,調節溫度控制鈕,使水浴箱溫度所示溫度保持在56℃。
④血清滅活。
血清瓶與帶溫度計的對照瓶一齊放入水浴箱中,待溫度計所示溫度上升至56℃時(shí), 定時(shí)30分鐘。
⑤大瓶血清滅活后,進(jìn)行分裝。
⑥保存。
分裝后,抽樣做無(wú)菌試驗,-20~-70℃保存。