對于費力擴增的細胞(如已轉染,或經(jīng)過(guò)體外刺激),如果細胞中發(fā)現有支原體污染,但此細胞又不愿丟棄,希望繼續培養,推薦使用MB公司生產(chǎn)的復合抗生素Zell Shield®。
注意:
①每次使用Zell Shield®之前,務(wù)必先用廠(chǎng)家推薦的“懸浮沖洗法”處理細胞,這樣才能達到最佳的支原體祛除效果。
②在祛除細胞支原體污染的過(guò)程中,需要環(huán)境、試劑及耗材確保潔凈,無(wú)新的支原體污染加入。
只要如法操作,在使用Zell Shield®四代后,細胞中的支原體即可祛除。
特點(diǎn)
(1)高效廣譜。Zell Shield®通過(guò)阻止支原體、真菌、霉菌、致命病菌增殖過(guò)程中DNA及蛋白的合成,有效抑制上述微生物的增殖。
(2)安全。無(wú)細胞毒性,采用復合支原體敏感抗生素,對大多數細胞株無(wú)毒。
(3)活性穩定。在細胞培養期間,Zell Shield®始終保持穩定的活性。
(4)使用方便。Zell Shield®為無(wú)菌溶液,可直接加入培養基使用。
用法
(1)在每次使用Zell Shield®之前,細胞傳代時(shí),先使用廠(chǎng)家推薦的“懸浮沖洗法”處理好細胞,再使用加了Zell Shield®的培養基養細胞,能達到*佳的祛除支原體的效果。(“懸浮沖洗法”的詳細步驟,見(jiàn)下一頁(yè))
(2)Zell Shield®常規為-18℃保存,建議使用前,先融化分裝,仍舊-18℃避光保存,使用時(shí)按需融化配置。避免反復凍融。
(3)Zell Shield®按1:100濃度可直接加入培養基。例如:500ml培養基中添加5ml Zell Shield®,50mL/瓶的Zell Shield®可供5L培養基使用。
廠(chǎng)家推薦的“懸浮沖洗法”(重要?。?/p>
(1)據研究表明,約98%的支原體存在于細胞表面和細胞間隙。細胞傳代時(shí),用干凈的PBS反復懸浮沖洗,就能把70%以上的支原體沖下來(lái)。
(2)支原體直徑在180~350nm之間,遠遠小于細胞直徑。通過(guò)低速離心,很容易將細胞和支原體分離,棄上清即可祛除大部分支原體。
儲存條件
-18℃,避光保存。
與培養基混合后2-8℃儲存,不超過(guò)4個(gè)星期。