細胞污染是指在細胞培養的過(guò)程中,外來(lái)的生物或物質(zhì)進(jìn)入培養體系中并繁殖生長(cháng),影響細胞的正常生長(cháng)和實(shí)驗結果,主要包括以下幾點(diǎn):
細胞生長(cháng)和增殖受到抑制。細胞污染會(huì )占用培養基的營(yíng)養物質(zhì)和氧氣,導致細胞的生長(cháng)和增殖受到抑制,甚至會(huì )導致細胞死亡。
實(shí)驗結果的穩定性受到影響。細胞污染會(huì )導致實(shí)驗中出現異常的數據和結果,影響實(shí)驗的可靠性和準確性。在一些研究中,細胞污染甚至會(huì )導致實(shí)驗失敗,浪費時(shí)間和資源。
細胞的基因表達和細胞功能受到影響。細胞污染可能會(huì )導致細胞基因表達水平的改變和細胞功能的異常。這些異??赡軙?huì )被錯誤地歸因于實(shí)驗因素而掩蓋真正的實(shí)驗結果。
細胞污染對細胞培養的影響非常嚴重,因此,進(jìn)行細胞培養實(shí)驗時(shí),需要提高警惕,盡可能降低細胞污染的可能性。
預防污染的關(guān)鍵點(diǎn)
Cell Culture
這里,我們總結了一些常見(jiàn)的污染“雷區",幫助大家盡可能“掃除"細胞培養過(guò)程中障礙。如有遺漏,歡迎小伙伴們在評論區中補充。
雷區一:解凍過(guò)程操作不當
水面超過(guò)冷凍管蓋沿×
正常情況下,細胞凍存管內部為無(wú)菌設計,保障細胞安全。解凍時(shí),凍存管的蓋子下邊緣應位于水浴鍋?lái)?yè)面上方,避免其接觸水面。
另外,需要定期清潔水浴鍋,為水浴鍋更換無(wú)菌水??梢允褂玫聡鳰B水浴環(huán)境專(zhuān)用的支原體祛除試劑:Water Shield。
雷區二:培養基配制過(guò)程操作不當
忽視無(wú)菌操作,導致培養基被污染×
在整個(gè)細胞培養過(guò)程中,都應注意無(wú)菌操作。在細胞培養基配好后,建議先抽取少許放入培養瓶/培養皿內,在37℃培養箱內放置24~48h,檢測培養液是否有污染。
胎牛血清的品質(zhì)對于細胞培養而言也是十分重要的。選擇一款內毒素含量低、通過(guò)各項無(wú)菌檢測的胎牛血清,既保證了實(shí)驗安全,又可以在一定程度上確保實(shí)驗結果的穩定。
Ausbian進(jìn)口特級胎牛血清,內毒素含量≤3EU/ml,各項微生物均為未檢出。
雷區三:沒(méi)有定期維護實(shí)驗室衛生
實(shí)驗垃圾不及時(shí)清理,實(shí)驗環(huán)境不及時(shí)清潔×
要根據使用頻率定期清潔實(shí)驗室,包括超凈臺操作臺面;細胞實(shí)驗室臺面;培養箱、冰箱、水浴鍋、離心機、顯微鏡等實(shí)驗設備及儀器等。
德國MB的Mycoplasma-off,支原體祛除噴霧劑,可在幾分鐘內迅速殺除支原體、真菌、細菌等微生物,可在幾分鐘內迅速殺除支原體。