胚胎發(fā)育研究是發(fā)育生物學(xué)中一個(gè)重要研究分支,而細胞培養實(shí)驗是胚胎發(fā)育的重要實(shí)驗手段之一。Ausbian進(jìn)口特級胎牛血清,是細胞培養實(shí)驗的好幫手,內毒素含量低,全程冷鏈運輸。
發(fā)育中的哺乳動(dòng)物胚胎,協(xié)調了一系列復雜而精確協(xié)調的形態(tài)發(fā)生過(guò)程,從而形成了一個(gè)發(fā)育的生物體。
早期胚胎發(fā)育包括一系列的卵裂分裂和最初的細胞命運決定,這些決定促進(jìn)了從全能受精卵到囊胚的發(fā)育,包括胚胎的基礎組織:外胚層和兩個(gè)胚外細胞系,下胚層(小鼠的原始內胚層)和滋養細胞外胚層發(fā)育為所有的胎兒組織,下胚層發(fā)育為卵黃囊,滋養層發(fā)育為胎盤(pán)。外胚層細胞、下胚層細胞和滋養層細胞已經(jīng)成功地在體外再生為不同類(lèi)型的干細胞,如胚胎干細胞(ESCs)、滋養層干細胞(TSCs)和胚胎外內胚層(XEN)干細胞。通過(guò)隨機或引導分化,大量先前的研究已經(jīng)證明這些干細胞可以產(chǎn)生類(lèi)似于其體內對應體的衍生物。例如,ESCs可以分化為所有三種生殖層和原始生殖細胞,XEN細胞可以分化為內臟內胚層和頂葉內胚層,TSCs可以分化為胞外滋養細胞和合胞滋養細胞。
雖然小鼠ESCs主要是受譜系限制的,但它們可以在特定條件下分化為胚胎外細胞類(lèi)型。例如,已經(jīng)觀(guān)察到從ESCs到XENs的自發(fā)轉換。這一證據支持了早期外胚干細胞具有胚胎外譜系可塑性的觀(guān)點(diǎn)。與這一概念相一致,小鼠擴展多能干細胞或擴展潛能干細胞(EPSCs)具有與早期小鼠外胚層相似的轉錄譜,已顯示出雙向發(fā)育能力。這些小鼠EPSCs在體外和體內都有助于胚胎和胚胎外譜系。同樣,將人類(lèi)EPSCs (hEPSCs)注射到早期小鼠胚胎中,可以促進(jìn)胚胎和胚胎外組織的形成。
各種胚胎和胚胎外干細胞的衍生促進(jìn)了通過(guò)自組織或組裝方法產(chǎn)生早期胚胎模型。值得注意的是,綜合干細胞衍生的胚胎模型,包括胚胎和胚胎外組織,已經(jīng)證明了在模擬小鼠原腸胚形成和早期器官發(fā)生方面的巨大潛力。傳統的人類(lèi)多能干細胞(PSCs),包括人類(lèi)胚胎干細胞(hESCs)和人類(lèi)誘導多能干細胞(hiPSCs),具有引物多能性,但胚胎外譜系的潛力有限盡管已經(jīng)建立了基于PSCs的人類(lèi)原腸胚形成的非整合模型,但這些模型缺乏胚胎外組織,阻礙了對原腸胚周?chē)P(guān)鍵形態(tài)發(fā)生事件的研究,包括雙層盤(pán)、原始條紋、三層盤(pán)、卵黃囊等的形成。此外,盡管人類(lèi)囊胚(blastoids)的綜合模型最近得到了發(fā)展,但它們在植入后的發(fā)育能力有限。因此,一個(gè)概括人類(lèi)原腸胚周?chē)l(fā)育關(guān)鍵過(guò)程的綜合模型尚未建立。
在這項研究中,利用hEPSCs的雙向發(fā)育潛能,研究人員開(kāi)發(fā)了一個(gè)強大而有效的方案,促進(jìn)hEPSCs的分化和自組織,成為人類(lèi)原腸胚周?chē)l(fā)育的先進(jìn)集成模型。該模型概括了從植入后立即到早期器官發(fā)生的關(guān)鍵發(fā)育過(guò)程。原腸系膜周?chē)男纬山?jīng)歷了幾個(gè)不同的階段,最初分離成上皮細胞樣和次母細胞樣腔室,隨后形成羊膜樣和原代卵黃囊樣腔室,產(chǎn)生原始的條紋狀和三股盤(pán)狀結構,并開(kāi)始早期器官發(fā)生。該模型的強大之處在于它能夠在最小的外部干預下利用hEPSCs顯著(zhù)的自組織能力。