工欲善其事,必先利其器。想要做好細胞實(shí)驗,前期的準備很重要。
1、選擇正確的培養基
在養細胞之前,就要了解,你所養細胞的來(lái)源以及種類(lèi)和名稱(chēng)。
選擇正規途徑來(lái)源的細胞,索取細胞培養條件,并查閱文獻,確定所需培養液種類(lèi)以及是否需要添加特殊成分,常用的細胞培養液有DMEM、RPMI1640、F12等等,一些常見(jiàn)的細胞基本可以使用這幾種培養基中的一種來(lái)培養,有的需要加入一定其他成分,這需要根據不同的細胞類(lèi)型,查ATCC細胞庫或者查文獻,才能找到所需最佳培養液。選擇正確的培養液是養好細胞的第一步。
2、了解細胞的生長(cháng)習性
不同的細胞生長(cháng)習性不同。如成纖維細胞是貼壁生長(cháng),有一定的密度依賴(lài)性,密度小可能會(huì )出現不增殖,狀態(tài)差的情況,接種密度大時(shí)則需要隔天傳代,頻繁傳代則影響細胞狀態(tài);再如RPMI-8226人多發(fā)性骨髓瘤細胞,是懸浮生長(cháng)的,傳代需離心棄去上清即可??傊?,了解細胞生長(cháng)習性,再加上正確的計數,才能掌握好傳代的密度。
3、準備無(wú)菌環(huán)境
千里之堤潰于蟻穴,細菌、真菌、支原體等微生物的生長(cháng)速度塊和破壞力強,會(huì )破壞細胞結構,影響實(shí)驗結果。使用紫外線(xiàn)照射、定期用專(zhuān)用試劑進(jìn)行實(shí)驗室清潔等,都有助于降低細胞污染的風(fēng)險。
4、選擇優(yōu)質(zhì)的血清
血清中含有細胞生長(cháng)所必須的生長(cháng)因子,作為哺乳動(dòng)物細胞培養的附加物,血清的添加是十分重要的,因此,選擇優(yōu)質(zhì)的血清,是細胞培養成功與否的關(guān)鍵!Ausbian進(jìn)口胎牛血清,內毒素含量低,澳洲血源,全程冷鏈運輸,為細胞培養保駕護航。