胎牛血清(Fetal Bovine Serum,FBS)是在生物醫學(xué)研究和細胞培養中廣泛使用的重要生物制品,它含有豐富的生長(cháng)因子、蛋白質(zhì)和其他生物分子,對細胞生長(cháng)和增殖起著(zhù)至關(guān)重要的作用。制備胎牛血清是一個(gè)復雜的過(guò)程,通常由專(zhuān)業(yè)的生物制品公司進(jìn)行,以確保其質(zhì)量和純度。在本文中,我們將介紹一般的胎牛血清制備過(guò)程的主要步驟。
步驟1:采集胎牛血液
制備胎牛血清的第一步是采集胎牛的血液。這需要在專(zhuān)業(yè)場(chǎng)所進(jìn)行,確保采集的胎牛來(lái)自健康且受監控的牧場(chǎng)。采集血液需要遵循倫理和動(dòng)物福利的法規和標準。確保供體是5-8月齡的牛胚胎。
步驟2:血液分離
采集的胎牛血液會(huì )經(jīng)過(guò)離心分離,將血漿與血細胞分開(kāi)。血漿中包含了胎牛血清的大部分有利于細胞體外生長(cháng)和繁殖的營(yíng)養成分,如蛋白質(zhì)、生長(cháng)因子和激素。
步驟3:過(guò)濾和清理
分離后的血漿會(huì )經(jīng)過(guò)過(guò)濾等步驟,以去除殘留的細胞碎片和顆粒物。這有助于提高血清的質(zhì)量和純度,確保它不含有微生物或其他污染物。
步驟4:滅菌
胎牛血清需要進(jìn)行滅菌處理,以確保其中不含有微生物污染。常見(jiàn)的滅菌方法包括過(guò)濾、輻照(細胞治療專(zhuān)用)等,這些方法可以有效地殺滅細菌、病毒和其他微生物。
以Ausbian進(jìn)口特級胎牛血清為例:將經(jīng)過(guò)初步檢測合格的很多供體胎牛的粗血清,混合在一起,在低溫條件下,經(jīng)七次加壓過(guò)濾,最后三次為0.1 µm無(wú)菌過(guò)濾處理,得到淺黃色,澄清,稍粘稠液體。同一批次血清質(zhì)量上基本無(wú)差異。不同廠(chǎng)家一個(gè)批次產(chǎn)量差異較大,從100升到2000升不等。批次大,更利于試驗的穩定和連續的可參照性。
步驟5:質(zhì)量控制
制備后的胎牛血清通常會(huì )經(jīng)過(guò)一系列的質(zhì)量控制測試,包括檢測其對細胞培養的兼容性、生長(cháng)因子和激素水平,以確保其質(zhì)量符合要求。這些測試有助于驗證血清的質(zhì)量和生物活性。
步驟6:分裝和儲存
制備后的胎牛血清會(huì )被分裝到小瓶或小管中,并嚴格冷凍保存。這有助于防止血清中的成分降解或受到污染。儲存溫度通常為零下20攝氏度或更低,以確保血清的長(cháng)期保存穩定性。
總之,制備胎牛血清是一個(gè)復雜的過(guò)程,需要專(zhuān)業(yè)的設備和技術(shù)。在實(shí)驗室中,研究人員通常會(huì )從可靠的商業(yè)供應商購買(mǎi)胎牛血清,這些供應商生產(chǎn)的胎牛血清符合嚴格的質(zhì)量標準,可以用于細胞培養和生物醫學(xué)研究。正確使用和存儲胎牛血清是確保實(shí)驗成功的關(guān)鍵,因此研究人員應遵循供應商的建議和操作規程,以充分利用這一重要的生物制品。