與傳統的動(dòng)物模型相比,體外的細胞培養模型相對操作簡(jiǎn)便,實(shí)驗結果重復性也相對更高。.自20世紀50年代以來(lái),胎牛血清作為常用、高效的添加物,在世界范圍內被廣泛應用于體外細胞培養。
胎牛血清,是由胎牛血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物,含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長(cháng)因子、激素、無(wú)機物等,其組成成份大部分已知,但還有一部分尚不清楚,這些物質(zhì)對促進(jìn)細胞生長(cháng)或抑制生長(cháng)活性是達到生理平衡的。其中不含細胞、纖維蛋白和凝血因子。胎牛血清在細胞培養方面通常優(yōu)于其他類(lèi)型的血清。由于胎牛從未接觸過(guò)外界,與新生牛和小牛血清相比,抗體含量明顯降低,故抗體與培養細胞發(fā)生交叉反應的風(fēng)險也較低,是理想的細胞生長(cháng)補充劑。
近日的一項研究,探究了細胞培養與胎牛血清的關(guān)系。
該項研究中,無(wú)論采用國產(chǎn)還是進(jìn)口的胎牛血清培養Sp2/0其細胞克隆數、細胞數量和細胞活率差異均無(wú)統計學(xué)意義(P>0.05).這與已有的研究結果相類(lèi)似.究其原因可能是Sp2/0與MDCK同屬細胞系,部分遺傳物質(zhì)已發(fā)生改變,且帶有癌變的特點(diǎn),能在體外培養條件下無(wú)限制地傳代,對血清的依賴(lài)降低,因此能在各類(lèi)型血清中較好地生長(cháng)增殖.研究中還發(fā)現:進(jìn)口胎牛血清培養的豬胎兒成纖維細胞,其細胞克隆數、細胞數量和活率均極顯著(zhù)高于國產(chǎn)胎牛血清(P<0.01)有科研人員利用不同來(lái)源胎牛血清培養骨髓間充質(zhì)干細胞,發(fā)現在使用FBS1培養過(guò)程中,骨髓間充質(zhì)干細胞逐漸死亡,而FBS2培養的骨髓間充質(zhì)干細胞不但能很快貼壁和迅速增殖,而且傳代培養后能保持很強的分裂增殖能力.推測可能是因為豬胎兒成纖維細胞與骨髓間充質(zhì)干細胞屬于原代細胞,保持了體內的生物學(xué)特性.因不同來(lái)源胎牛血清,其采集方式與生產(chǎn)加工工藝不同,所含促細胞生長(cháng)因子等活性物質(zhì)的組份與比例也有所不同,導致原代細胞的生長(cháng)、增殖受血清來(lái)源影響較大。
不同來(lái)源胎牛血清質(zhì)量差異大,即使同一品牌、同一貨號,因供血動(dòng)物性別、生理、營(yíng)養等條件不同,也會(huì )存在批次間的差異。該研究利用豬胎兒成纖維細胞對同一品牌、同一貨號,3個(gè)不同批次的胎牛血清進(jìn)行了測試,結果顯示:FBS2-1形成的細胞克隆小,且細胞克隆數極顯著(zhù)低于FBS2-2和FBS2-3(P<0.01);培養10d后,FBS2-1的細胞數量和細胞活率極顯著(zhù)低于FBS2-2和FBS2-3(P<0.01),雖然FBS2-2的細胞克隆數極顯著(zhù)低于FBS2-3(P<0.01),但是FBS2-2的細胞克隆大,且細胞數量極顯著(zhù)高
于FBS2-3(P<0.01).該項實(shí)驗篩選出FBS2-2是豬胎兒成纖維細胞的適宜血清。
由此實(shí)驗可以看出,不同細胞對于胎牛血清的要求不同,不同批次、品牌的胎牛血清培養效果也不盡相同,在選購時(shí),需要盡量選擇可提供試用服務(wù)的品牌,在小范圍內,對細胞進(jìn)行培養實(shí)驗,已選擇更符合實(shí)驗要求的胎牛血清。