貼壁細胞作為生物醫學(xué)研究中常用的一種細胞類(lèi)型,在實(shí)驗室中扮演著(zhù)重要的角色。然而,支原體污染可能會(huì )對貼壁細胞的實(shí)驗結果和健康產(chǎn)生嚴重影響。本文將介紹如何判斷貼壁細胞是否被支原體污染、污染后的處理方法以及預防措施。
判斷貼壁細胞是否被支原體污染
1. 細胞形態(tài)觀(guān)察
一般情況下,支原體污染的早期,通過(guò)顯微鏡難以觀(guān)察到貼壁細胞有明顯變化。支原體污染的中后期,可能導致細胞形態(tài)異常,如形態(tài)不規則、大小不一、培養液提前變黃、細胞大量漂浮、細胞活力下降等現象。
2. PCR檢測
使用聚合酶鏈反應(PCR)技術(shù)檢測細胞中是否存在支原體DNA。PCR是一種高度敏感的方法,可用于檢測微量的支原體。
處理支原體污染的貼壁細胞
1. 隔離受污染細胞
首先,需要將被支原體污染的細胞與其他無(wú)污染的細胞進(jìn)行隔離,防止污染的擴散。
2. 清潔和消毒
清潔受污染的培養皿、培養器具和工作臺,使用有效的消毒劑,如德國MB公司的Mycoplasma off支原體清除噴霧劑。
3. 處理污染細胞
如果貼壁細胞已經(jīng)被污染,需要停止使用這些細胞并盡早處理。如果是不能隨意丟棄的細胞,可使用Mynox®珍貴生物樣品支原體清除試劑對細胞中的支原體進(jìn)行清除。
4. 檢查其他細胞系
檢查實(shí)驗室中其他細胞系是否也存在支原體污染,以防止污染傳播。
預防貼壁細胞支原體污染
1. 嚴格的實(shí)驗室操作規范
在無(wú)菌條件下操作。
定期清潔和消毒實(shí)驗室設備和工作區域。
避免直接接觸可能污染的物品,如培養皿、試劑瓶等。
2. 使用無(wú)菌技術(shù)
使用經(jīng)過(guò)驗證的無(wú)菌技術(shù)進(jìn)行細胞培養、傳代和操作。
使用無(wú)菌的培養器具和培養基。
3. 定期檢測
定期對貼壁細胞進(jìn)行支原體污染的檢測,及時(shí)發(fā)現并處理。
建立規范的檢測流程,包括PCR、免疫染色等方法。
貼壁細胞的支原體污染可能對實(shí)驗結果和研究產(chǎn)生嚴重影響,因此及時(shí)識別、處理和預防支原體污染是至關(guān)重要的。只有確保細胞的無(wú)菌狀態(tài),才能保證實(shí)驗結果的準確性和可靠性,進(jìn)而推動(dòng)科研工作的順利進(jìn)行。
通過(guò)以上的方法和注意事項,希望可以幫助研究人員更好地管理和保護貼壁細胞,確保其在實(shí)驗室中的健康和純凈狀態(tài)。