細胞培養過(guò)程中的支原體污染:來(lái)源、影響及預防措施
在細胞培養實(shí)驗中,支原體污染是一種常見(jiàn)的污染現象。支原體是一種介于細菌和病毒之間的微生物,它們具有高度的適應性和生存能力,能夠在多種環(huán)境中存活并繁殖。因此,細胞培養過(guò)程中支原體污染的來(lái)源多種多樣,對細胞實(shí)驗產(chǎn)生不良影響,需要采取有效的預防措施。
支原體污染的來(lái)源主要包括以下幾個(gè)方面:
1、實(shí)驗室環(huán)境中可能存在支原體污染源,如空氣中的塵埃、其他培養物中的支原體污染等。2、實(shí)驗操作人員的手部、衣物以及實(shí)驗器材等都可能成為支原體污染的媒介。
3、細胞培養基、血清等培養材料也可能受到支原體的污染。
支原體污染對細胞實(shí)驗的不良影響主要體現在以下幾個(gè)方面:
1、支原體污染會(huì )導致細胞生長(cháng)緩慢、形態(tài)改變,甚至引起細胞死亡,嚴重影響實(shí)驗結果的準確性和可靠性。
2、支原體污染還可能干擾細胞的代謝過(guò)程,影響細胞的功能和表達,從而干擾實(shí)驗結果的分析和解讀。
3、此外,支原體還可能作為外源性因素,對實(shí)驗結果產(chǎn)生潛在的干擾,使研究者難以區分細胞的內在變化與外界因素的影響。
為了避免支原體污染,我們可以采取以下預防措施:
1、加強實(shí)驗室的清潔和消毒工作,定期清潔實(shí)驗室環(huán)境、實(shí)驗器材以及培養箱等設備,減少支原體污染的風(fēng)險。使用德國MB公司生產(chǎn)的支原體祛除試劑:Mycoplasma Off對實(shí)驗室進(jìn)行清潔。
2、實(shí)驗操作人員應嚴格遵守實(shí)驗室規范,穿戴專(zhuān)用的實(shí)驗服和手套,避免直接接觸細胞培養物。同時(shí),實(shí)驗操作人員應定期接受培訓,提高實(shí)驗技能和操作水平,減少操作過(guò)程中的污染風(fēng)險。
3、選擇質(zhì)量可靠的培養基、血清等培養材料,避免使用來(lái)源不明的培養材料,降低支原體污染的可能性。Ausbian進(jìn)口胎牛血清,經(jīng)過(guò)7次無(wú)菌過(guò)濾,最后3次為3微米濾膜過(guò)濾,清除潛在的支原體污染。
除了上述預防措施外,我們還可以通過(guò)定期檢測細胞培養物中的支原體污染情況來(lái)及時(shí)發(fā)現并處理污染問(wèn)題。常用的檢測方法包括PCR檢測、支原體特異性抗體檢測等。一旦發(fā)現支原體污染,應立即停止實(shí)驗,對污染細胞進(jìn)行清理和消毒,并對實(shí)驗環(huán)境進(jìn)行重新評估和調整,以防止污染的擴散和再次發(fā)生。