GRKs是絲氨酸/蘇氨酸導向的蛋白激酶,來(lái)自三個(gè)家族的七個(gè)成員。有幾篇論文報道了GRK4在乳腺癌發(fā)病機制中的作用。為了探討G蛋白偶聯(lián)受體激酶4 (GRK4)對HepG2細胞的生物學(xué)作用及其可能的生物學(xué)機制??蒲腥藛T用過(guò)表達grk4的慢病毒載體(OE)和陰性對照慢病毒載體(NC)感染HepG2細胞,用流式細胞術(shù)(FCM)評估細胞增殖、周期和凋亡。利用定量蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)分析比較OE細胞和NC細胞的蛋白譜和差異表達蛋白(DEPs),并利用生物信息學(xué)分析和平行反應監測(PRM)技術(shù)研究其功能、表達和可能的機制。
結果
接受OE的HepG2細胞比接受NC的HepG2細胞生長(cháng)更慢。流式細胞儀顯示,與NC細胞相比,OE細胞發(fā)生了s期周期阻滯,OE細胞和NC細胞均未發(fā)生凋亡。在定量蛋白質(zhì)組學(xué)鑒定的7006個(gè)蛋白中,根據過(guò)濾參數檢測了403個(gè)DEPs,其中135個(gè)表達下調,268個(gè)表達上調。除了參與過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體(PPAR)信號通路外,DEPs還參與細胞增殖、周期和代謝的生物學(xué)過(guò)程。PRM驗證了與PPAR通路相關(guān)的DEPs的表達。
結論
本研究表明,GRK4可阻止HepG2細胞增殖,使細胞周期阻滯在s期,而PPAR通路通過(guò)GRK4參與HepG2細胞的調控。
本實(shí)驗中,用到了Ausbian牛血清系列產(chǎn)品。.Ausbian品牌擁有全系列血清產(chǎn)品線(xiàn):
Ausbian澳洲進(jìn)口特級胎牛血清、細胞治療專(zhuān)用胎牛血清(貨號:WS500T(紅點(diǎn))),透析胎牛血清(貨號:WS500TZ)等多系列產(chǎn)品,服務(wù)更專(zhuān)業(yè)更精準。