上皮細胞是抵御病原體入侵的主要防線(xiàn)。然而,細菌病原體具有破壞這一屏障并促進(jìn)細菌遷移的能力。然而,結核分枝桿菌(M.tb)在這一過(guò)程中所采用的具體分子機制尚不清楚。
在吸入氣溶膠顆粒后,細菌往往在肺部形成持續感染,導致特征性肺結核綜合征的發(fā)展。此外,結核分枝桿菌可以突破肺泡屏障,從而引發(fā)肺外結核。結核分枝桿菌的發(fā)病機制嚴重依賴(lài)于全身傳播,盡管其確切的潛在機制尚未闡明。
肺泡上皮屏障由緊密連接和粘附連接組成,在抵御病原體入侵方面起著(zhù)重要的作用。在近日發(fā)表的一項研究中,科研人員提出了,關(guān)于結核分枝桿菌胞外絲氨酸蛋白酶Rv2569c的重大發(fā)現,該酶通過(guò)e -鈣粘蛋白的裂解促進(jìn)細菌的轉運。文章標題為:“Serine protease Rv2569c facilitates transmission of Mycobacterium tuberculosis via disrupting the epithelial barrier by cleaving E-cadherin"
實(shí)驗結論:
科研人員通過(guò)評估Rv2569c切割e -鈣粘蛋白的能力,來(lái)研究Rv2569c在結核分枝桿菌易位中的作用。e -鈣粘蛋白是細胞-細胞粘附連接的重要組成部分,在細菌入侵期間被破壞。利用在大腸桿菌中表達并通過(guò)親和層析純化的重組Rv2569c,實(shí)驗證明了Rv2569c具有細胞壁相關(guān)絲氨酸蛋白酶活性。
此外,Rv2569c能夠降解一系列蛋白質(zhì)底物,包括酪蛋白、纖維蛋白原、纖維連接蛋白和e -鈣粘蛋白。
科研人員還確定了Rv2569c蛋白酶活性的適宜條件是溫度為37℃,pH為9.0,MgCl2存在。為了研究Rv2569c在結核分枝桿菌中的功能,科研人員制備了Rv2569c的缺失突變體及其補充菌株,并將其用于感染A549細胞和小鼠。
A549細胞感染實(shí)驗結果顯示,Rv2569c具有裂解E-cadherin的能力,促進(jìn)M.tb通過(guò)極化的A549上皮細胞層遷移。此外,體內感染實(shí)驗表明,Rv2569c可以破壞E-cadherin,增強M.tb的定植,并在C57BL/6小鼠的肺部引起病理損傷。
總之,這些結果強烈表明結核分枝桿菌利用絲氨酸蛋白酶Rv2569c破壞上皮防御,并通過(guò)跨越上皮屏障促進(jìn)其全身傳播。
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