干細胞研究離不開(kāi)干細胞的體外培養實(shí)驗。干細胞培養需要胎牛血清的支持,胎牛血清含有各類(lèi)生長(cháng)因子,幫助干細胞實(shí)現體外增殖。Ausbian進(jìn)口胎牛血清,內毒素含量低,品質(zhì)穩定。
細胞表面受體的聚集可以增強和維持細胞外信號的激活,并且對操縱受體聚集的技術(shù)有相當大的興趣。設計的蛋白質(zhì)組件先前已被用于使用天然存在的受體結合結構域驅動(dòng)受體聚集,和幾何可調的二聚體配體已被用于探測二聚體幾何對信號輸出的影響。高階受體組合被認為在各種信號系統中起作用;呈現受體結合結構域的可調寡聚支架將有助于研究埃級拓撲結構對受體輸出的影響。以前的設計工作已經(jīng)產(chǎn)生了具有各種循環(huán)對稱(chēng)性的低聚物,但這些蛋白質(zhì)不容易被修改以產(chǎn)生不同的受體結合構型。
成纖維細胞生長(cháng)因子(FGF)受體(FGFRs)是酪氨酸激酶,在胚胎發(fā)育和癌癥中起關(guān)鍵作用。該通路是復雜且高度調控的,有四個(gè)FGF受體基因和兩個(gè)異構體,通過(guò)外顯子8和外顯子9的選擇性剪接產(chǎn)生,它們改變第三個(gè)免疫球蛋白(Ig)樣結構域(D3),產(chǎn)生受體異構體IIIb和IIIc(在整個(gè)文本中分別稱(chēng)為“b"和“c")。盡管D3是FGF結合區域的一部分,并且受體異構體對各種FGF配體具有不同的親和力,但這兩種異構體對適當組織分化的貢獻尚不清楚c-異構體在許多實(shí)體癌中被擴增,因此可能是癌癥治療的靶點(diǎn)
為了能夠系統地探索受體價(jià)和幾何形狀如何影響信號傳導結果,科研人員使用可模塊化擴展的重復蛋白構建塊設計了具有多達8個(gè)亞基的環(huán)狀同源低聚物。通過(guò)將全新設計的成纖維細胞生長(cháng)因子受體(FGFR)結合模塊整合到這些支架中,科研人員生成了一系列合成信號配體,這些配體表現出有效的價(jià)和幾何依賴(lài)性Ca2+釋放和絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)途徑激活。設計的激動(dòng)劑的高特異性揭示了兩種FGFR剪接變體在早期血管發(fā)育過(guò)程中驅動(dòng)動(dòng)脈內皮和血管周?chē)毎\的不同作用??蒲腥藛T設計的模塊化組件應該廣泛用于揭示關(guān)鍵發(fā)育轉變信號的復雜性,并開(kāi)發(fā)未來(lái)的治療應用。
相關(guān)研究發(fā)表在《Cell》上,文章標題為:“Modulation of FGF pathway signaling and vascular differentiation using designed oligomeric assemblies"。
科研人員描述了幾何可調環(huán)狀低聚物的全新設計,以克服當前支架系統的局限性,并使用這些合成支架與FGFR c-異構體特異性設計的微型粘合劑21來(lái)探測和操縱血管分化。通過(guò)從頭設計的環(huán)形蛋白質(zhì)來(lái)調控成纖維細胞生長(cháng)因子(FGF)信號通路和血管分化,這種新設計的蛋白質(zhì)能夠指導人類(lèi)干細胞形成新血管,這種對干細胞發(fā)育的調控,為科研人員探究再生科學(xué)打下基礎。