化學(xué)限定培養基是指培養基中的素有成分都是明確的,它同樣不含版有動(dòng)物蛋白,同樣也不是添加了權植物水解物,而是使用了一些已知結構與功能的小分子化合物,如短肽、植物激素等.更有利于分析細胞的分泌產(chǎn)物。
使用:
1.融化
將培養基放到沸水浴中或采用其他有相同效果的方法(如高壓鍋中的蒸汽)融化。經(jīng)過(guò)高壓滅菌后盡量減少重新加熱的時(shí)間,避免過(guò)度加熱。融化后立即移開(kāi),室溫靜置片刻(約2min),以免玻璃容器發(fā)生破裂。
融化后的培養基放入47℃~50℃恒溫水浴鍋中保溫,冷卻到47℃~50℃所需的時(shí)間取決于其類(lèi)型、體積和在水鍋里的分裝量。融化后應盡快使用,放置時(shí)間一般不超過(guò)4h。剩余的化學(xué)限定培養基固后不得再次融化使用。特別是靈敏性的,應根據相關(guān)標準,縮短融化后放置的時(shí)間。
將其倒入類(lèi)似檢測培養使用的獨立容器中,插入溫度計,記錄并保存瓊脂的融化溫度。
加入樣品的培養基應將溫度調節到44℃~47℃,或按照相關(guān)標準調節溫度。
2.脫氣
必要時(shí),在使用前將養基放到沸水浴或蒸汽浴中加熱15min,加熱時(shí)松開(kāi)容器蓋子;加熱后蓋緊蓋子,并迅速冷卻至使用溫度。
3.添加成分的加入
對熱不穩定的添加成分應在培養基冷卻至47℃~50℃時(shí)加入,滅菌的添加成分加入前應冷卻至室溫,避免冷的液體會(huì )造成瓊脂凝膠或形成片狀物。將添加成分慢加入并充分混勻,盡快分裝到待用的容器中。
4.棄置
所有污染和未使用的化學(xué)限定培養基的棄置應采用安全的方式,并符合相關(guān)法律法規的規定。