關(guān)于維生素測定培養基的這些問(wèn)題,您肯定也遇到過(guò)
更新時(shí)間:2021-08-11 | 點(diǎn)擊率:1025
維生素測定培養基是利用萊士曼氏乳酸桿菌對維生素的特異性和靈敏性,定量測定出試樣中維生素的含量。在測定用培養基中供給除維生素以外的所有營(yíng)養成分,這樣萊士曼乳桿菌生長(cháng)濃度(吸光度)就會(huì )同標準曲線(xiàn)工作液及未知待測溶液中維生素的含量呈正比的線(xiàn)性關(guān)系。以不同濃度標準溶液的維生素含量為橫軸,以萊士曼乳桿菌生長(cháng)濃度(吸光度)為縱軸,即可繪制標準曲線(xiàn),根據標準曲線(xiàn)即可計算出試樣中維生素的含量。
維生素測定培養基的常見(jiàn)問(wèn)題回答:
1.該測定培養基能用肉眼判斷其pH值嗎?
答:該測定培養基中酚紅的含量與普通培養基中的酚紅含量不同,不能通過(guò)肉眼觀(guān)察或通過(guò)經(jīng)驗來(lái)判定pH值,建議使用pH計進(jìn)行測定。
2.什么培養基中可以省去加酚紅?
答:酚紅在培養基中用作pH值的指示劑:中性時(shí)為紅色,酸性時(shí)為黃色,堿性時(shí)為紫色。酚紅本身對生物制品質(zhì)量并不會(huì )產(chǎn)生影響,可以通過(guò)純化技術(shù)去除,但酚紅在無(wú)血清培養基可能帶來(lái)胞內鈉/鉀失衡,影響細胞生長(cháng),當然這種作用能被血清所中和或減輕。酚紅并不是培養基中必需的一種成分,很多國外的疫苗或抗體生產(chǎn)企業(yè)在生產(chǎn)過(guò)程中都使用無(wú)酚紅培養基。
3.谷氨酰胺溶液和碳酸氫鈉的配制方法是什么?
答:以0.2mol/L的L-谷氨酰胺配制為例:稱(chēng)取L-谷氨酰胺2.92g,加注射用水100ml,充分攪拌混勻。用0.2μm濾膜正壓過(guò)濾除菌。溶液應在4℃下避光保存,2周內使用。
以7.5%NaHCO3的配制為例:稱(chēng)取NaHCO37.5g溶于100ml蒸餾水中過(guò)濾除菌。
4.維生素測定培養基的緩沖系統是什么?
答:平衡鹽一般是由無(wú)機鹽及葡萄糖組成的。平衡鹽有Hanks′系統、Earle′s系統、Dulbecco′s磷酸緩沖鹽系統等。