支原體DNA抽提Kit的操作方法
更新時(shí)間:2022-10-25 | 點(diǎn)擊率:638
支原體DNA抽提Kit有如下幾種情況。如細胞培養液中存在抑制PCR的物質(zhì),這時(shí)就需要提取。細胞培養基中的血清濃度如果超過(guò)12%,那么對下游的PCR反應會(huì )產(chǎn)生抑制。酚紅,對熒光定量PCR的檢測也會(huì )干擾。這些均可以通過(guò)使用Miverva公司的支原體DNA提取試劑盒來(lái)克服。對于樣品類(lèi)型是細胞團、疫苗、凍存細胞和石蠟包埋的組織,也需要提前提取DNA。另外,如果樣品中蛋白含量高于10mg/ml,則先需要用蛋白酶K進(jìn)行處理。
支原體DNA抽提Kit與細胞培養高度重合的培養條件,注定了支原體要與細胞共同競爭有限的生存資源。
早有研究表明,一些支原體(包括最為常見(jiàn)的人型支原體、發(fā)酵支原體、精氨酸支原體等),通過(guò)精氨酸脫亞胺酶分解精氨酸來(lái)供能。當這些支原體混入細胞培養體系后,會(huì )與細胞爭搶精氨酸,導致細胞「吃不飽飯」,出現營(yíng)養不良的癥狀:生長(cháng)速率異常、活力下降、易脫壁等等。
如果你培養的細胞出現以下情況,基本可以確定是支原體感染了,不放心的話(huà)可以再配合支原體檢測試劑(檢測神器幫你揪出培養基中的支原體?。┻M(jìn)一步確認。
支原體DNA抽提Kit細胞被支原體污染后的表現
1.細胞生長(cháng)緩慢
2.細胞變形
3.培養基中碎片增加
4.細胞易聚團
5.鏡下觀(guān)察有小黑點(diǎn)
6.培養基提前變色