描述:支原體常規PCR檢測試劑盒(不含Taq酶)1.內控對照為獨立包裝,遵循歐洲藥典和日本藥典操作流程。2.高特異性,僅一條陽(yáng)性對照條帶,即可涵蓋所有可能感染細胞的支原體物種。操作簡(jiǎn)單,易于觀(guān)察。3. 高靈敏度,若PCR反應體系加入10μl樣本,支原體檢測限度為≤5或≤10CFU。
廠(chǎng)商性質(zhì)
代理商更新時(shí)間
2024-05-17訪(fǎng)問(wèn)量
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規格 | 25次/盒 | 供貨周期 | 一個(gè)月 |
主要用途 | 用于【細胞和生物制品】及其生產(chǎn)過(guò)程中【支原體】污染的檢測 | 應用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
支原體常規PCR檢測試劑盒(不含Taq酶)
10種常見(jiàn)支原體檢測限
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支原體常規PCR檢測試劑盒(經(jīng)典法)(不含Taq酶)操作步驟
第1步:樣本處理
a. 細胞培養上清
b. 生物藥或需遵循藥典的樣本
說(shuō)明:①樣品基質(zhì)可能會(huì )影響檢測的靈敏度。收集和篩選更高的樣品量可提高測定靈敏度。
②細胞培養物樣本含豐富的DNA酶,在低溫下也能降解支原DNA,影響檢測靈敏度。
建議:樣本做DNA抽提處理,實(shí)現高靈敏度。
推薦:德國MB公司生產(chǎn)的支原體DNA提取試劑盒,Venor® Gem Sample Preparation Kit。該DNA抽提試 劑盒已經(jīng)過(guò)廣泛驗證。
第2步:試劑制備
第3步:PCR體系建立
a. 細胞培養上清
b. 生物藥或需遵循藥典的樣本
第4步:?jiǎn)?dòng)PCR反應
第5步:電泳結果分析
191bp為內控對照條帶,表明PCR反應正常。
當樣本存在支原體污染時(shí),由于內控對照與支原體DNA存在競爭,內控對照條帶變弱(例如支原體DNA>103拷貝)。
陽(yáng)性對照中支原體DNA>104拷貝,內控對照條帶會(huì )*消失。
可能在80-90bp存在引物自退火形成的條帶,此條帶不影響檢測結果。
如果待測樣本對PCR產(chǎn)生抑制,則內控對照條帶變弱(和陰性對照相比),此時(shí)應先進(jìn)行DNA抽提(推薦使用:Venor® Gem Sample Preparation Kit 支原體DNA抽提試劑盒,然后再檢測。