應用
葉酸干酪培養基用于葉酸的微生物法測定。干酪乳桿菌(ATCC 7469)為測定用菌。
培養基組分
成分 克/升
無(wú)維生素酸水解酪蛋白 10.000
葡萄糖 40.000
醋酸鈉 40.000
磷酸氫二鉀 1.000
磷酸二氫鉀 1.000
DL-色氨酸 0.200
天門(mén)冬酰胺 0.600
抗壞血酸 4.000
L-胱氨酸鹽酸鹽 0.500
硫酸腺嘌呤 0.010
尿嘧啶 0.010
黃嘌呤 0.020
脫水山梨糖醇單油酸酯絡(luò )合物 0.100
還原型谷胱甘肽 0.005
硫酸鎂 0.400
氯化鈉 0.020
硫酸亞鐵 0.020
硫酸錳 0.015
核黃素(維生素B2) 0.001
對氨基苯甲酸(PABA) 0.002
鹽酸吡哆醇 0.004
鹽酸硫胺素 0.0004
泛酸鈣 0.0008
煙酸 0.0008
生物素 0.00002
zui終pH值 (25°C) 6.7±0.2
質(zhì)量控制
Ø外觀(guān)——米黃色至黃色均一自由流動(dòng)粉末
Ø制備好的培養基顏色和透明度——淡琥珀色透明溶液,可能有輕微沉淀
Ø配比濃度——在25°C下9.4%w/v(8.5g/100ml水)水溶液,pH值為6.7±0.1
ØpH值——6.60-6.80
配置
稱(chēng)取9.4g干粉培養基溶于100ml蒸餾水,加入50mg抗壞血酸。加熱至沸騰使培養基*溶解。測定時(shí),分裝至每管為5ml培養基(包含標準品和待測樣品)。加蒸餾水,使總體積達到10ml。高壓消毒15磅121°C 5分鐘。立即冷卻。
培養反應
采用干酪乳桿菌(ATCC 7469)進(jìn)行葉酸的微生物法測定。35-37°C孵育16-18小時(shí)。
生長(cháng)狀況
可獲得良好的生長(cháng)。隨著(zhù)測定管葉酸標準品濃度升高(即 0, 0.1,0.2, 0.4, 0.6, 0.8,1ng),干酪乳桿菌生長(cháng)逐漸遞增,伴隨著(zhù)620nm處吸光度的增加。
文獻
1. Flynn, Williams, ODell and Hogan, 1951, Anal. Chem., 23, 180.
2. Baker, Herbert, Frank, Pasher, Hunter, Wasserman and Sobotka, 1959,Clin. Chem., 5, 275.
3. Waters and Mollin, 1961, J. Clin. Path., 14, 335.