根據我國的食品安全標準,對嬰兒配方食品需測定葉酸含量,以保證在正常范圍。具體測定以微生物培養法為選擇。小編現將具體過(guò)程拆解如下,以資感興趣人士參考。
所需儀器有天平、培養箱、離心機(需能放置試管)、超聲波振蕩器、pH計、分光光度計、渦旋振蕩器等。所需培養基有維持培養基、接種培養基和測定培養基,可購買(mǎi)商品化產(chǎn)品(建議進(jìn)口產(chǎn)品,以保證質(zhì)量),以節省人力和時(shí)間。培養基干粉需按產(chǎn)品說(shuō)明制備和滅菌,放置在10℃以下密閉容器中保存。
樣本制備,可直接稱(chēng)量0.1至0.5g,至小數點(diǎn)后三位,轉入100ml錐形瓶中。用80ml氫氧化鈉乙醇溶液溶解,超聲震蕩2-4小時(shí),加水定容。對樣本液進(jìn)行適當稀釋?zhuān)箻颖救~酸含量在0.2ng/ml~0.6ng/ml中。
再取3支試管(所用試管需嚴格鹽酸浸泡和高溫烘干消毒),分別加入0.5、1.0、2.0ml稀釋后的樣本,補水至5ml。再加入5ml葉酸測定用培養液,混勻。
制備葉酸標準溶液。先制備儲存液(20μg/ml),即稱(chēng)取20mg標準品,用氫氧化鈉溶液在1000ml容量瓶中溶解定容,再用分光光度法進(jìn)行濃度標定。儲存液可在棕色瓶中4℃儲存2年。用儲存液可配置中間液(0.2μg/ml)和工作液(0.2ng/ml)。再配濃度梯度工作液,使葉酸量從0ng, 0.05ng, 0.1ng,0.2ng遞增至1ng(先補水5ml,再加5ml葉酸測定用培養液)。再高壓滅菌15分鐘。
測定時(shí),向每支測定管加入20μl接種液,塞好棉塞,37℃培養20-40小時(shí),直至獲得zui大渾濁度。
那么,接種菌液如何制備,zui后如何用分光光度計檢測和分析結果呢?小編下次為您拆解。
葉酸干酪培養基(即葉酸測定培養液)可向北京締一生物購買(mǎi),該產(chǎn)品為培養基生產(chǎn)商HiMedia公司生產(chǎn)。其工藝及產(chǎn)品質(zhì)量均通過(guò)了ISO9001、ISO13485、WHO-GMP、CE和FDA認證,質(zhì)量可靠,性能,產(chǎn)品行銷(xiāo)140多個(gè)國家。
北京締一生物科技有限公司,作為HiMedia公司在中國的代理商,在微生物培養和檢測領(lǐng)域,一如既往地為您帶來(lái)的服務(wù)。