胎牛血清和新生牛血清都是細胞常用的天然培養基。胎牛血清常用于較難養、比較嬌氣的細胞和干細胞,新生牛血清通常適用于比較好養的細胞,特別用于病毒疫苗的工業(yè)生產(chǎn)以及廣泛的科研領(lǐng)域。在實(shí)際應用中,常需要確定牛血清的濃度。常用濃度為5%~20%,也有用更低濃度的牛血清,這主要依賴(lài)于所用的人工合成培養基的類(lèi)型、組成和營(yíng)養程度。如果合成培養基的營(yíng)養較豐富,那么可適當降低牛血清的濃度。它也依賴(lài)于所培養的細胞類(lèi)型和培養的目的。下面以水牛卵母細胞為例。
在2008年,廣西大學(xué)等單位曾報道了不同濃度牛血清和白蛋白對水牛卵母細胞體外成熟的影響。卵母細胞的體外成熟是胚胎體外生產(chǎn)技術(shù)中的關(guān)鍵環(huán)節。
研究人員將經(jīng)卵母細胞清洗2--3遍后,放入預先平衡過(guò)的不同濃度的牛血清(ECS,FCS,注:ECS為發(fā)情牛血清)及牛血清白蛋白(BSA)的成熟培養液中,其中對照組采用基礎培養液;并放入39℃、含5%CO及飽和濕度的培養箱內培養?;A培養液為T(mén)CM199中加入一定量的激素(LH,FSH,雌二醇)。培養方式為微滴培養法,在60mm培養皿中作12~16個(gè)滴,每滴放30--40枚卵丘一卵母細胞復合體,并在培養液滴上面覆蓋石蠟油。
研究人員觀(guān)察了在基礎培養液中添加不同牛血清及其濃度分別0(對照),10%ECS,20%ECS,10%FCS,20%FCS對水牛卵母細胞體外成熟的影響。結果顯示:10%ECS,20%ECS,10%FCS組的細胞成熟度顯著(zhù)高于對照組,又以10%ECS組為突出。隨著(zhù)FCS血清濃度的增加,成熟度逐漸提高,但無(wú)顯著(zhù)差異。作者認為,添加血清是必要的,但不需太高的濃度。
可見(jiàn),設定一個(gè)觀(guān)測指標,進(jìn)行濃度梯度試驗,是可以找到一個(gè)濃度的。
品名:Ausbian精制新生牛血清
貨號:VS500N
批號:1712A
規格:500ml/瓶
市場(chǎng)價(jià):1600元
歡樂(lè )價(jià):800元
*活動(dòng):買(mǎi)10瓶送3瓶,100瓶送40瓶
上海締一生物生物公司提供的Ausbian精制新生牛血清(貨號:VS500N)為澳洲進(jìn)口,血源來(lái)自新西蘭,均經(jīng)過(guò)嚴格質(zhì)控,如檢測總蛋白、支原體、牛病毒性腹瀉病毒、牛副流感病毒等,確保營(yíng)養的同時(shí)不含病原體,指標達標,經(jīng)廣泛使用,受到好評。
參考文獻
李曉霞,等. 不同濃度的牛血清及牛血清白蛋白對水牛卵母細胞體外成熟的影響. 河南農業(yè)科學(xué). 2008,7:108-116