一篇發(fā)表在雜志Nature Genetics上的研究報告中,來自意大利、英國和美國的科學(xué)家們通過研究分離了一群免疫細(xì)胞相關(guān)的基因突變,其或會影響機(jī)體患自身免疫性疾病的風(fēng)險,文章中,研究人員詳細(xì)描述了這種用來揭示前所未知的免疫細(xì)胞突變的技術(shù)和工具,這些突變與多種人類免疫相關(guān)疾病直接相關(guān)。
此前研究結(jié)果表明,許多曾經(jīng)被認(rèn)為是器官特異性或位點特異性的疾病或與機(jī)體的免疫狀況有關(guān),而炎性疾病、多發(fā)性硬化癥和川崎病只是幾個例子而異,作為對這些研究發(fā)現(xiàn)的回應(yīng),近年來,科學(xué)家們一直在深入研究相關(guān)的免疫細(xì)胞及可能導(dǎo)致這些疾病發(fā)生的相關(guān)變異。
這項研究中,研究人員對來自意大利撒丁區(qū)的3500名參與者機(jī)體的血液樣本進(jìn)行了全基因組關(guān)聯(lián)性研究,他們利用基因分型譜技術(shù)和歸因分析技術(shù)作為一種手段來尋找涉及731種免疫細(xì)胞特性的突變,實際的工作包括使用細(xì)胞表面標(biāo)記物和基于流式細(xì)胞術(shù)的細(xì)胞分選手段。
總而言之,研究人員分析了血液樣本中大約2200萬個突變的數(shù)據(jù),其中一些來自于同一家族的個體,在此過程中,研究者還發(fā)現(xiàn)了122個單核苷酸多態(tài)性,其中52個是新的特征,17個基因位點獨立地與459個單一的細(xì)胞特性有關(guān),研究者指出,這些多態(tài)性中還包括大約36個與已知自身免疫性疾病相關(guān)的基因位點的突變。
隨后研究者還進(jìn)行了精細(xì)化繪圖、后續(xù)驗證、選擇性分析、表達(dá)和定量特征位點的分析來更好地了解其所分離出來的特性之間的關(guān)聯(lián)性,而更重要的是,他們還想觀察是否能發(fā)現(xiàn)與自身免疫性疾病發(fā)生相關(guān)的未知關(guān)聯(lián),下一步研究者將會利用蛋白定量特征位點技術(shù)來調(diào)查是否存在這種關(guān)聯(lián),以幫助發(fā)現(xiàn)與已經(jīng)使用的藥物之間的任何關(guān)聯(lián),并闡明這些藥物是否還能用于治療其它病癥,未來,在基于免疫細(xì)胞亞型和相關(guān)疾病治療的研究過程中,針對不止一種通路或蛋白質(zhì)進(jìn)行靶向性研究或許是未來研究的一個大方向。
生命科學(xué)實驗中,離不開胎牛血清,胎牛血清 在細(xì)胞培養(yǎng)中的作用:
1. 提供對維持細(xì)胞指數(shù)生長的激素,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。
2. 提供結(jié)合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結(jié)合或調(diào)節(jié)它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。
3. 有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到解毒作用。
4. 是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源。
5. 起酸堿度緩沖液作用。
6. 提供蛋白酶抑制劑,使在細(xì)胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護(hù)細(xì)胞不受傷害。
7. 參與細(xì)胞凍存。
在細(xì)胞培養(yǎng)中,胎牛血清加入基礎(chǔ)培養(yǎng)基的濃度大多為5%~20%(常見為10%)的。具體到不同試驗,應(yīng)依據(jù)文獻(xiàn)報導(dǎo),或細(xì)胞類型或基礎(chǔ)培養(yǎng)基的成分來確定濃度。
胎牛血清應(yīng)在-20℃儲存,運(yùn)輸應(yīng)干冰冷鏈運(yùn)輸,避免反復(fù)凍融,確保血清中因子活性不受影響,保證血清優(yōu)良品質(zhì)。