培養原代細胞是一項復雜的工作,其關(guān)鍵點(diǎn)包括以下幾個(gè)方面:
細胞類(lèi)型選擇:不同類(lèi)型的細胞需要不同的培養條件,因此首先需要明確要培養的細胞類(lèi)型,例如動(dòng)物細胞、植物細胞等。
培養基的配制:培養基是細胞生長(cháng)所必需的營(yíng)養物質(zhì)和生長(cháng)因子的混合物,需要按照特定的配方制備。不同類(lèi)型的細胞需要不同的培養基,因此需要根據細胞類(lèi)型選擇適合的培養基,并嚴格按照配方制備。另外,血清也是一個(gè)重要因素。Ausbian進(jìn)口胎牛血清,內毒素含量低,品質(zhì)穩定。
細胞培養條件的控制:細胞需要特定的生理和環(huán)境條件才能生長(cháng)和分裂。因此需要控制培養箱中的溫度、濕度、CO2濃度、通氣性等參數,以及培養皿的密閉性和材料的選擇等因素,以提供適合的生長(cháng)環(huán)境。
細胞的傳代:細胞在培養基中生長(cháng)和分裂,逐漸形成細胞層。為了保持細胞的生長(cháng)狀態(tài)和活性,需要及時(shí)將細胞移植到新的培養皿中進(jìn)行傳代,以維持細胞的生長(cháng)和分裂。
消除細胞污染:在細胞培養過(guò)程中,細胞污染是常見(jiàn)的問(wèn)題,如細菌、真菌、病毒等。因此需要采取適當的措施,如滅菌、消毒、過(guò)濾等,以避免細胞污染對細胞生長(cháng)和實(shí)驗結果的影響。
胎牛血清,是由胎牛血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物,含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長(cháng)因子、激素、無(wú)機物等,其組成成份大部分已知,但還有一部分尚不清楚,這些物質(zhì)對促進(jìn)細胞生長(cháng)或抑制生長(cháng)活性是達到生理平衡的。其中不含細胞、纖維蛋白和凝血因子。