《中國藥典》是針對合格藥品制定的國家標準,國家藥品標準的重要組成部分,是藥品研制、生產(chǎn)(進(jìn)口)、經(jīng)營(yíng)、使用和監督管理等相關(guān)單位均應遵循的法定技術(shù)標準。
《藥典》中規定,支原體是生物制品工業(yè)對細胞庫、病毒收獲液、疫苗等需要常規檢測的一項指標,關(guān)乎生產(chǎn)過(guò)程和產(chǎn)品的安全。它同時(shí)也是臨床細胞治療前所必查的一項指標。
支原體的檢測方法在實(shí)際應用時(shí),常需要用到標準品,包括質(zhì)控標準品或參比標準品。
標準品如同一把標尺,能夠衡量方法是否達到標準,合乎要求。例如,PCR方法常用于致病菌和支原體的檢測,但其方法也需要進(jìn)行驗證,即靈敏度、特異性等,都需要達到要求。方法達到要求之后才能夠用于質(zhì)檢部門(mén)對樣品的檢查。
支原體檢測
標準品
支原體核酸法是一種比較快的檢測方法。國際上對支原體核酸法替代傳統方法的驗證,提出了相應的要求:檢測限(又稱(chēng)為靈敏度)、特異性等,并且指出“在獲得充分的比對數據后才可替代藥典得傳統方法"。這時(shí)就需要選用合適的支原體核酸標準品。
標準品一般由有關(guān)部門(mén)頒發(fā),或者是由國外提供的、經(jīng)過(guò)質(zhì)量檢驗合格的標準品。德國MB公司(Minerva Biolabs)提供有三類(lèi)標準品:靈敏度標準品、特異性標準品、PCR定量標準品,分別有不同的用途。
靈敏度標準品
德國MB公司的支原體靈敏度標準品(滅活支原體),涵蓋了歐洲藥典和日本藥典規定的支原體物種,用于支原體核酸擴增法(PCR/qPCR)的方法學(xué)驗證。
特異性標準品
德國MB特異性驗證用標準品,它包括支原體基因組DNA或細菌基因組DNA,用于PCR和qPCR方法對支原體物種的特異性檢查,每種支原體DNA經(jīng)測序驗證,濃度經(jīng)滴度測定。該標準品為10ng左右包裝,為凍干粉型。
PCR定量標準品
德國MB還提供經(jīng)過(guò)嚴格定量的支原體DNA標準品,每管支原體基因組DNA的量為1×10^8基因組拷貝??捎糜谔荻认♂尯?,qPCR標準“曲線(xiàn)的繪制",也可用于評估qPCR支原體檢測方法的檢測閾限和線(xiàn)性回歸,以及不同檢測方法的“橫向比較"。