CRISPR技術(shù)是近些年來(lái)風(fēng)靡生物界的前沿基因編輯技術(shù)。CRISPR技術(shù)經(jīng)常需要在細胞培養過(guò)程中進(jìn)行,因此,細胞培養技術(shù)是此類(lèi)研究的基礎。對于常見(jiàn)且培養難度相對較低的細胞來(lái)說(shuō),新生牛血清足以滿(mǎn)足需求。Ausbian進(jìn)口新生牛血清,營(yíng)養豐富,內毒素含量低,冷鏈運輸,可以滿(mǎn)足常規細胞培養的要求。
γδ T細胞是有效的抗癌效應物,具有廣泛靶向腫瘤的潛力,獨立于患者特異性新抗原或人白細胞抗原背景。γδ T細胞可以感知轉化細胞中普遍存在的保守細胞應激信號2,盡管靶向應激靶細胞的機制尚不清楚。
v - γ - 9v - δ2 T細胞是人類(lèi)γ - δ T細胞中豐富的子集,它識別含有親丁酸蛋白2A1 (BTN2A1)和BTN3A1(參考文獻)的蛋白復合物。一種廣泛表達的細胞表面蛋白,被腫瘤細胞大量產(chǎn)生的磷酸抗原激活。
近日,研究人員在靶癌細胞中結合全基因組CRISPR篩選來(lái)鑒定調節γδ T細胞殺傷和BTN3A細胞表面表達的途徑。篩選結果顯示,細胞表面BTN3A豐度的多層調控以及通過(guò)轉錄、翻譯后修飾和膜運輸觸發(fā)γδ T細胞。
相關(guān)研究發(fā)表在《Nature》上,文章標題為:“CRISPR screens decode cancer cell pathways that trigger γδ T cell detection"。
此外,各種遺傳擾動(dòng)和抑制劑破壞了癌細胞的代謝途徑,特別是atp產(chǎn)生過(guò)程,被發(fā)現改變了BTN3A水平。代謝危機期間BTN3A和BTN2A1的誘導依賴(lài)于amp活化蛋白激酶(AMPK)。最后,在細胞系模型和患者來(lái)源的腫瘤類(lèi)器官中,AMPK的小分子激活導致BTN2A1-BTN3A復合物的表達增加,并增加v γ γ 9v δ2 T細胞受體介導的殺傷。這種代謝應激誘導配體上調的ampk依賴(lài)性機制加深了對γδ T細胞應激監測的理解,并為增強γδ T細胞抗癌活性提供了新的途徑。