熟悉細胞實(shí)驗的朋友應該都知道,血清在整個(gè)細胞培養的過(guò)程中發(fā)揮著(zhù)重要作用。如何選擇高品質(zhì)的胎牛血清,才能盡可能保障實(shí)驗能夠順利進(jìn)行?需要關(guān)注哪些關(guān)鍵指標?本期內容,一起探高品質(zhì)胎牛血清的選擇標準有哪些。
血清的生產(chǎn)工藝
為了保證胎牛血清產(chǎn)品的均一性和穩定性,胎牛血清生產(chǎn)需遵循相關(guān)規定進(jìn)行操作。一般來(lái)說(shuō),胎牛血清制備需經(jīng)過(guò)以下幾個(gè)步驟:
采集→離心→分離→無(wú)菌過(guò)濾
用來(lái)制作血清的牛血,是通過(guò)采集多頭牛的血液混合而成的,因此,想要在同一批次得到大批量品質(zhì)穩定的血清,獲得大量健康、符合當地法律法規的供體動(dòng)物,是先決條件。
采集(5-8月齡牛胚胎)、離心以及粗血清分離的過(guò)程,不能保證絕對的無(wú)菌,因此,整個(gè)過(guò)程中,無(wú)菌過(guò)濾就成為重中之重。嚴格的無(wú)菌過(guò)濾,能夠盡可能祛除細菌、支原體等微生物的污染,保證胎牛血清品質(zhì)。
Ausbian特級胎牛血清,經(jīng)過(guò)7重無(wú)菌過(guò)濾,最后3次為0.1μm濾膜過(guò)濾,有效祛除粗血清中的支原體等微生物,保證血清品質(zhì)優(yōu)異。
胎牛血清檢測指標
血清出廠(chǎng)前,需要進(jìn)行嚴格的檢測,符合規定數值方能出廠(chǎng),以下指標可供參考:
PH:6.7-8.2之間;
滲透壓:260-340mosm/kg之間;
血紅蛋白含量:<20mg/dL;
總蛋白含量:30-50g/L;
白蛋白含量:14-34g/L;
α、β、γ球蛋白含量則以實(shí)際測量為準;
球蛋白(G或GLB)是多種蛋白質(zhì)的混合物,包括具有防御作用而且含量較多的免疫球蛋白和補體、多種糖蛋白。胎牛血清中含有α-球蛋白、β-球蛋白、γ球蛋白三種。血清批次不同,球蛋白含量也不同,以實(shí)際測量為準。
IgG:<250μg/mL;
內毒素含量:<10EU/mL;
過(guò)高含量的內毒素對細胞培養影響巨大:高含量的內毒素可以改變細胞外形、活化細胞,產(chǎn)生訊息傳遞物質(zhì)、抑制酶活性、抑制人工受精的成功率等。血清中內毒素含量過(guò)高,更容易導致細胞“亞健康",造成數據不準,或細胞狀態(tài)不良、老化、甚至死亡,導致試驗中斷失敗。所以要盡量選擇內毒素低的血清。
無(wú)菌檢測:陰性;
需要注意的是,厭氧菌、好氧菌、真菌(最容易污染細胞的酵母菌和霉菌都應包括在內)以及支原體檢測。檢測結果應全部為陰性,視為通過(guò)無(wú)菌檢測。
病毒檢測:陰性;
每個(gè)地區的法規會(huì )有些許區別,但牛副流感3型病毒(PI-3)、牛腹瀉病毒(BVD)、牛細小病毒等是任何國家和地區的檢測報告中,都應標注清楚的。
抗體檢測:陰性
胎牛血清效果檢測
一般檢測過(guò)程中,會(huì )用血清促進(jìn)細胞增殖的能力,來(lái)評判血清的使用效果。每一批次血清應就克隆率、細胞毒性、細胞增殖密度、和倍增時(shí)間進(jìn)行檢查。
所有檢測結果應符合相應的規范。
通過(guò)胎牛血清的檢測報告,可初步判定胎牛血清的品質(zhì)。選擇高品質(zhì)的胎牛血清,是高效培養細胞的重要前提。
以Ausbian特級胎牛血清為例:Ausbian進(jìn)口特級胎牛血清,精選內毒素更低的批次,平均檢測結果<3EU/mL,有些甚至低于1EU/mL,其余指標也均符合相關(guān)要求,讓細胞培養更安心!各類(lèi)病原檢測也均為陰性,順利通過(guò)各項無(wú)菌檢測。蛋白指標也都標注清晰,多批次平行供應,滿(mǎn)足多種實(shí)驗需求。專(zhuān)業(yè)幫助,匯集近二十年,千萬(wàn)個(gè)血清用戶(hù)細胞培養經(jīng)驗,為各種細胞培養提供問(wèn)題梳理分析,解決方案參考。